什么是色谱法？

色谱法

色谱法又称“色谱分析”、“色谱分析法”、“层析法”，是一种分离和分析方法，在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。

色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配，以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动，最终达到分离的效果。

分离原理

使混合物中各组分在两相间进行分配，其中一相是不动的，叫做固定相;另一相则是推动混合物流过此固定相的流体，叫做流动相。当流动相中所含有的混合物经过固定相时，就会与固定相发生相互作用。由于各组分在性质上与结构上的不同，相互作用的大小强弱也有差异。

因此，在同一推动力作用下不同组分在固定相中滞留时间又长又短，从而按先后不同的次序从固定相中流出。这种借在两相分配原理而使混合物中各组分获得分离的技术，称为色谱分离技术或色谱法。

色谱分类

作为色谱流动相的有气体和液体。当用液体作流动相时，称为液相色谱;当用气体作流动相时，称为气相色谱。对于色谱固定而言，也有两种状态：即固体吸附剂和在固定单体上载有液体的固定相。

色谱法具体分为气相色谱法、液相色谱法和广义毛细管电泳法三大类。
色谱法的特点

优点：

分离效能高

灵敏度高

分析速度快

应用范围广泛

装置简单、操作方便

缺点：

在缺乏标准样品的情况下，定性分析较困难，对于高沸点，不能气化和热不稳定的物质不能用气相色谱法分离和测定。

气相色谱法

气相色谱法是一种在有机化学中对易于挥发而不发生分解的化合物进行分离与分析的色谱技术。

简单滴来说，气相色谱法就是流动相为气体的色谱分析法、气固、气液色谱。

特点：

应用范围较广：样品必须具有足够高的蒸汽压;

分离效能高：能分离分析复杂及性能相近的混合物;

灵敏度高：具有高灵敏度、通用检测器;

分析速度快：几分钟或几十分钟。

液相色谱法

液相色谱法就是用液体作为流动相的色谱法。

液相色谱法的分离机理是基于混合物中各组分对两相亲和力的差别。根据固定相的不同，液相色谱分为液固色谱、液液色谱和键合相色谱。应用最广的是以硅胶为填料的液固色谱和以微硅胶为基质的键合相色谱。根据固定相的形式，液相色谱法可以分为柱色谱法、纸色谱法及薄层色谱法。按吸附力可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱和凝胶渗透色谱。近年来，在液相柱色谱系统中加上高压液流系统，使流动相在高压下快速流动，以提高分离效果，因此出现了高效(又称高压)液相色谱法。

固定相是高效液相色谱(HPLC)技术的核心，其性能特点直接影响着分离分析的最终结果。开发新型的满足分离分析需求的固定相对HPLC的应用和发展至关重要，也是解决当前所面临的分离分析问题的关键措施。

由于具有分辨率高、选择性强和分离重现性好等特点，RPLC是当前色谱分离分析中使用最为广泛的色谱模式，适用于大多数弱极性和中等极性化合物的分离分析。

毛细管电泳法

高效毛细管电泳又叫毛细管电泳(CE)，指以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道。依据样品中各组分之间淌度(电渗透的大小单位)和(或)分配行为上的差异而实现分离的一种液相分离技术。

CE是经典电泳技术和现代微柱分离技术相结合的产物。